蛋白快速染色液(免脫色)用戶指南
產(chǎn)品概述
蛋白快速染色液(免脫色)是一款專為科研工作者設(shè)計的高效蛋白質(zhì)染色試劑。該產(chǎn)品顯著縮短了傳統(tǒng)蛋白染色流程所需的時間,同時省略了繁瑣的脫色步驟,在保證高靈敏度和分辨率的前提下,極大地提高了實驗效率,適用于 SDS - PAGE(十二烷基硫酸鈉 - 聚丙烯酰胺凝膠電泳)等多種蛋白分離凝膠的染色分析。
技術(shù)原理
本染色其中的染色成分能夠特異性地與蛋白質(zhì)分子結(jié)合。在染色過程中,染色劑通過靜電作用、疏水作用以及范德華力等多種分子間作用力,迅速且牢固地附著于蛋白質(zhì)條帶之上。與傳統(tǒng)染色方法不同的是,該染色液中的添加劑能夠抑制背景染色,使得蛋白質(zhì)條帶在凝膠背景中清晰呈現(xiàn),無需額外的脫色步驟來去除背景雜色,從而實現(xiàn)快速、高對比度的染色效果。
產(chǎn)品特點
00001. 快速染色:相較于傳統(tǒng)染色方法數(shù)小時甚至過夜的染色時間,本染色液可大大節(jié)省實驗時間。
00001. 免脫色:創(chuàng)新配方使染色過程中背景染色得到有效控制,無需后續(xù)脫色操作,避免了因脫色過度或不足對實驗結(jié)果造成的影響,同時減少了實驗操作步驟和試劑消耗。
00001. 高靈敏度:能夠檢測到的蛋白質(zhì)含量,可清晰分辨出不同分子量的蛋白質(zhì)條帶,滿足科研對微量蛋白檢測的需求。
00001. 兼容性強:適用于各種常見的聚丙烯酰胺凝膠濃度,包括不同比例的分離膠和濃縮膠,且與多種蛋白樣品制備方法兼容。
使用方法
染色前準備
00001. 完成 SDS - PAGE 電泳后,小心取出凝膠,放入合適的染色容器中。建議使用塑料或玻璃容器,避免使用金屬容器以防染色液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
00001. 準備適量的蛋白快速染色液。根據(jù)凝膠的大小和數(shù)量,按照每平方厘米凝膠面積使用比例進行準備。
染色步驟
00001. 將準備好的蛋白快速染色液緩慢倒入裝有凝膠的容器中,確保凝膠浸沒在染色液中。染色液應(yīng)覆蓋凝膠表面以保證染色均勻。
00001. 將容器置于水平搖床上,設(shè)置轉(zhuǎn)速,在室溫下染色。染色過程中,染色液中的成分會逐漸與蛋白質(zhì)結(jié)合,蛋白質(zhì)條帶將開始顯現(xiàn)。
結(jié)果觀察與記錄
00001. 染色完成后,直接將凝膠從染色液中取出,置于凝膠成像系統(tǒng)或透射式紫外分析儀下觀察。此時,蛋白質(zhì)條帶應(yīng)清晰可見,背景干凈。
00001. 使用凝膠成像軟件對結(jié)果進行拍照記錄。調(diào)整合適的曝光時間、對比度和亮度等參數(shù),以獲取清晰、準確反映蛋白質(zhì)條帶信息的圖像。建議保存原始圖像文件,以便后續(xù)分析。
注意事項
00001. 染色液具有一定的腐蝕性,使用時需佩戴手套、護目鏡等防護裝備,避免皮膚和眼睛直接接觸。如不慎接觸,應(yīng)立即用大量清水沖洗,并及時就醫(yī)。
00001. 染色液應(yīng)避光保存于 4℃冰箱中,使用前需恢復(fù)至室溫。避免反復(fù)凍融,以免影響染色效果。
00001. 不同品牌和批次的凝膠可能對染色效果有輕微影響。若使用新的凝膠產(chǎn)品,建議進行預(yù)實驗以優(yōu)化染色條件。
00001. 染色后的凝膠和剩余染色液應(yīng)按照實驗室化學(xué)廢棄物處理規(guī)定進行妥善處理,避免對環(huán)境造成污染。
常見問題及解決方法
00001. 染色條帶不清晰:可能原因是染色時間不足或染色液濃度過低??蛇m當(dāng)延長染色時間,或按照說明書比例增加染色液濃度后重新染色。
00001. 未檢測到目標蛋白條帶:檢查蛋白上樣量是否過低,可適當(dāng)增加上樣量并重做實驗。同時確認目標蛋白是否表達異常,可通過其他方法如 Western blot 進行驗證。
通過正確使用本蛋白快速染色液(免脫色),科研人員能夠高效、準確地對蛋白質(zhì)進行染色分析,為科研工作提供有力支持。